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二手HPLC基線漂移的原因和解決辦法
流動相的基線總是會漂移的,即使是等度洗脫。如果一個小時內(nèi)漂移在0.5mAU之內(nèi)的話,完全可以忽略。然后說到基線往下飄,最容易想到的就是流動相中,有機相的比例在減少。
二手HPLC基線漂移的原因:
① 柱溫波動。即使是很小的溫度變化都會引起基線的波動。通常影響示差檢測器、電導(dǎo)檢測器、較低靈敏度的紫外檢測器或其它光電類檢測器。
②流動相不均勻。流動相條件變化引起的基線漂移大于溫度導(dǎo)致的漂移。
③流通池被污染或有氣體。
④檢測器出口阻塞。高壓造成流通池窗口破裂,產(chǎn)生噪音基線。
⑤流動相配比不當(dāng)或流速變化。
⑥柱平衡慢,特別是流動相發(fā)生變化時。
⑦流動相污染、變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成。
⑧樣品中有強保留的物質(zhì)(高K’值)以饅頭峰樣被洗脫出,從而表現(xiàn)出一個逐步升高的基線。
⑨使用循環(huán)溶劑,不提倡。未調(diào)整檢測器。
⑩檢測器沒有設(shè)定在最大吸收波長處。
二手HPLC基線漂移的解決方法:
①控制好柱子和流動相的溫度,在檢測器之前使用熱交換器。
②使用HPLC級的溶劑,高純度的鹽和添加劑。流動相在使用前進行脫氣,使用中使用在線脫氣或氦氣脫氣。
③用甲醇或其他強極性溶劑沖洗流通池。如有需要,可以用1N的硝酸。(不要用鹽酸)
④取出阻塞物或更換管子。參考檢測器手冊更換流通池窗。
⑤更改配比或流速。為避免這個問題可定期檢查流動相組成及流速。
⑥用中等強度的溶劑進行沖洗,更改流動相時,在分析前用10-20倍體積的新流動相對柱子進行沖洗。使用離子對試劑、緩沖鹽更應(yīng)注意平衡柱。
⑦檢查流動相的組成。使用高品質(zhì)的化學(xué)試劑及HPLC級的溶劑 。
⑧改變分析條件。使用保護柱,如有必要,在進樣之間或在分析過程中,定期用強溶劑沖洗柱子。
⑨重新設(shè)定基線。使用新的流動相。
⑩將波長調(diào)整至最大吸收波長處。重選檢測波長。
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