二手液質聯用API LC-MS/MS 串聯質譜及液質聯用技術結合了色譜、質譜兩者的優點,將色譜的高分離性能和質譜的高鑒別特點相結合,組成了較完美的現代分析技術,近年來在生物醫學、藥學、環境檢測、毒物分析等領域發揮了巨大作用。且隨著現代化高新技術的不斷發展及二手液質聯用API LC-MS/MS液相色譜-質譜聯用技術自身的優點,液相色譜-質譜聯用技術必將在未來幾年不斷發展且在藥物分析中發揮越來越重要的作用。
                        

二手液質聯用API LC-MS/MS 檢測硝基呋喃類代謝物的九個步驟如下：

第一步：配制衍生化后的硝基呋喃代謝物標準溶液，乙腈/水體系，濃度10PPM 
確認儀器已經校準，氣體、電壓工作正常。 
測試條件： 
離子化方式: ESI+ 
進樣5ul/min， Q1 SCAN 觀察M/Z 335，236，249，209及同位素內標峰，通過調節DP，使這幾個峰最強。 
注意：（1）如買來的是已經衍生化的標準品，則可四種混配。 
          （2）如是用戶由硝基呋喃代謝物衍生化的，最好四種分別配制，要求Q1 SCAN能明顯觀察到上述離子。

第二步：以第一步測得值為母離子，做PRODUCT ION SCAN（MS2），調節CE等參數，使母，子離子都具有一定強度，平滑后得到MS2譜，從各母離子中各選擇2個最高的子離子，分別為 ：
呋喃它酮AMOZ： M/Z 291，262； 
呋喃唑酮AOZ： M/Z 134，104； 
呋喃妥因AHD： M/Z 134，104或178； 
呋喃西林SEM： M/Z 192，166，準確到0.1。 
注意：母離子要采用Q1SCAN測得值，子離子采用PRODUCT ION SCAN測得值。
第三步：以第二步選定的離子對，例如335.1/262.2 等，做MRM SCAN ，TIMS值各為50-200ms，強的離子對短些，弱的可長些。 
第四步：通過軟件操作優化各種參數，如溫度、氣流等。

第五步 ：在TUNE欄內點擊QUANTITATIVEOPTIMIZATION定量優化，只需優化 SOURCE/GAS項參數。
第六步 ：接好色譜柱，編輯LC梯度洗脫，進樣，觀察色譜峰形及保留時間是否合適，否則調節流動相，優化色譜條件。 
第七步 ：用空白提取液配制同樣濃度標樣，按上一步方法進樣，觀察色譜峰形及保留時間是否合適，峰高有無變化，有無離子抑制現象，否則調節流動相，優化色譜條件。 
第八步 ：用空白提取液配制一系列不同濃度硝基呋喃代謝物標樣，按上一步方法進樣，例如，分別稀釋為濃度0.25ug/kg, 0.5ug/kg, 1.0ug/kg, 2.0ug/kg, 4.0ug/kg, 8.0ug/kg, 等等。
第九步：按上述方法采集數據，做標準曲線,并進行硝基呋喃代謝物樣品的測定。如果4種同位素內標齊全，則定量時一一對應計算，如只有AOZ-D4和AMOZ-D5，則1種內標可對應2種硝基呋喃代謝物。