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在發展中求生存,不斷完善,以良好信譽和科學的管理促進企業迅速發展上篇我們有講到高效液相色譜儀HPLC檢測器的類型,其中紫外可見吸收檢測器是液相色譜儀HPLC中應用最廣泛的檢測器之一,幾乎所有的液相色譜儀都配有這種檢測器。其特點是靈敏度較高,線性范圍寬,噪聲低,適用于梯度洗脫,對強吸收物質檢測限可達1ng,檢測后不破壞樣品,可用于制備,并能與任何檢測器串聯使用。紫外可見檢測器的工作原理與結構同一般分光光度計相似,實際上就是裝有流動地的紫外可見光度計。
紫外吸收檢測器UV檢測器是液相色譜儀HPLC中最常用的檢測器,它占液相色譜儀HPLC檢測器使用率的75%,生產液相色譜的廠家基本都會配帶這種檢測器。
紫外吸收檢測器UV檢測器特點
● 靈敏度高,最小檢測量可達10-9g/mL,也可以檢測對于紫外吸收弱的組分;
● 線性范圍寬,大多數UV檢測器可以在1.5-2.0AU下保持良好的線性;
● 不易受溫度、流速等因素的影響
● 可用于梯度洗脫
● 可與不同檢測器串聯使用,如雙光路雙流路紫外/熒光檢測器(UV/FLD-1)
紫外吸收檢測器常用氘燈作光源,氘燈則發射出紫外-可見區范圍的連續波長,并安裝一個光柵型單色器,其波長選擇范圍寬(190nm~800nm)。它有兩個流通池,一個作參比,一個作測量用,光源發出的紫外光照射到流通池上,若兩流通池都通過純的均勻溶劑,則它們在紫外波長下幾乎無吸收,光電管上接受到的輻射強度相等,無信號輸出。當組分進入測量池時,吸收一定的紫外光,使兩光電管接受到的輻射強度不等,這時有信號輸出,輸出信號大小與組分濃度有關。
局限:流動相的選擇受到一定限制,即具有一定紫外吸收的溶劑不能做流動相,每種溶劑都有截止波長,當小于該截止波長的紫外光通過溶劑時,溶劑的透光率降至10%以下,因此,紫外吸收檢測器的工作波長不能小于溶劑的截止波長。
總結紫外吸收檢測器的優點、缺點
基于試樣組分對特定波長紫外可見光的選擇性吸收,組分濃度與吸光度成正比
1. 優點
① 靈敏度高,其最小檢測量10-9g/mL;
② 線性范圍寬;
③ 可用于梯度洗脫;
④ 波長可選,易于操作;
⑤ 可與任何檢測器串聯使用
2. 缺點
① 對紫外光完全不吸收的試樣不能檢測;
② 溶劑的選擇受限制
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